影響大慶井點(diǎn)降水設備電泳的因素
1)電泳降水介質(zhì)的pH值。溶液的pH值決定帶電物質(zhì)的解離程度,也決定物質(zhì)所帶凈電荷的多少。對蛋白質(zhì),氨基酸等類(lèi)似兩性電解質(zhì),pH值離等電點(diǎn)越遠,粒子所帶電荷越多,泳動(dòng)速度越快,反之越慢。因此,當分離某一種混合物時(shí),應選擇一種能擴大各種蛋白質(zhì)所帶電荷量差別的pH值,以利于各種蛋白質(zhì)的有效分離。為了保證電泳過(guò)程中溶液的pH值恒定,必須采用緩沖溶液。
2)緩沖液的離子強度。溶液的離子強度是指溶液中各離子的摩爾濃度與離子價(jià)數平方的積的總和的1/2。帶電顆粒的遷移率與離子強度的平方根成反比。低離子強度時(shí),遷移率快,但離子強度過(guò)低,緩沖液的緩沖容量小,不易維持pH值恒定。高離子強度時(shí),遷移率慢,但電泳譜帶要比低離子強度時(shí)細窄。通溶液的離子強度在0.02~0.2之間。
3)電場(chǎng)強度。降水電場(chǎng)強度(電勢梯度)是指每厘米的電位降(電位差或電位梯度)。電場(chǎng)強度對電泳速度起著(zhù)正比作用,電場(chǎng)強度越高,帶電顆粒移動(dòng)速度越快。根據實(shí)驗的需要,電泳可分為兩種:一種是高壓電泳,所用電壓在500~1000V或更高。由于電壓高,電泳時(shí)間短(有的樣品需數分鐘),適用于低分子化合物的分離,如氨基酸,無(wú)機離子,包括部分聚焦電泳分離及序列電泳的分離等。因電壓高,產(chǎn)熱量大,必須裝有冷卻裝置,否則熱量可引起蛋白質(zhì)等物質(zhì)的變性而不能分離,還因發(fā)熱引起緩沖液中水分蒸發(fā)過(guò)多,使支持物(濾紙,薄膜或凝膠等)上離子強度增加,以及引起虹吸現象(電泳槽內液被吸到支持物上)等,都會(huì )影響物質(zhì)的分離。另一種為常壓電泳,產(chǎn)熱量小,室溫在10~250C分離蛋白質(zhì)標本是不被破壞的,無(wú)需冷卻裝置,一般分離時(shí)間長(cháng)。
4)電滲現象。降水在電場(chǎng)中液體對于一個(gè)固體的固定相相對移動(dòng)稱(chēng)為電滲。在有載體的電泳中,影響電泳移動(dòng)的一個(gè)重要因素是電滲。最常遇到的情況是丫—球蛋白,由原點(diǎn)向負極移動(dòng),這就是電滲作用所引起的倒移現象。產(chǎn)生電滲現象的原因是載體中常含有可電離的基團,如濾紙中含有羥基而帶負電荷,與濾紙相接觸的水溶液帶正電荷,液體便向負極移動(dòng)。由于電滲現象往往與電泳同時(shí)存在,所以帶電粒子的移動(dòng)距離也受電滲影響;如電泳方向與電滲相反,則實(shí)際電泳的距離等于電泳距離加上電滲的距離。瓊脂中含有瓊脂果膠,其中含有較多的硫酸根,所以在瓊脂電泳時(shí)電滲現象很明顯,許多球蛋白均向負極移動(dòng)。除去了瓊脂果膠后的瓊脂糖用作凝膠電泳時(shí),電滲大為減弱。電滲所造成的移動(dòng)距離可用不帶電的有色染料或有色葡聚糖點(diǎn)在支持物的中心,以觀(guān)察電滲的方向和距離。
井點(diǎn)降水設備它包括四個(gè)過(guò)程及應用領(lǐng)域
1)電解(分解)。降水在陰極反應最初為電解反應,生成氫氣及氫氧根離子OH-,此反應造成陰極面形成。
一高堿性邊界層,當陽(yáng)離子與氫氧根作用成為不溶于水的物質(zhì),涂膜沉積,方程式為:H20+OH-+H+。
2)電泳動(dòng)(泳動(dòng)、遷移)。陽(yáng)離子樹(shù)脂及H+在電場(chǎng)作用下,向陰極移動(dòng),而陰離子向陽(yáng)極移動(dòng)過(guò)程。
3)電沉積(析出)。在被涂工件表面,陽(yáng)離子樹(shù)脂與陰極表面堿性作用,中和而析出不沉積物,沉積于被涂工件上。
4)電滲(脫水)。降水涂料固體與工件表面上的涂膜為半透明性的,具有多數毛細孔,水被從陰極涂膜中排滲出來(lái),在電場(chǎng)作用下,引起涂膜脫水,而涂膜則吸附于工件表面,而完成整個(gè)電泳過(guò)程。